HER2 i reakcja raka piersi na chemioterapię adiuwantową ad

Protokół próbny MA.5 został zatwierdzony przez instytucjonalną komisję odwoławczą w każdym ośrodku uczestniczącym, a pisemną świadomą zgodę uzyskano od każdej kobiety przed randomizacją. Schematy leczenia
Jak opisano wcześniej, 5,6 schematu CMF składał się z sześciu cykli doustnego cyklofosfamidu (Cytoxan, Bristol-Myers Sąuibb) w dawce 100 mg na metr kwadratowy powierzchni ciała w dniach od do 14, 40 mg metotreksatu ( Wyeth [dawniej Lederle]) na metr kwadratowy dożylnie w dniach i 8 oraz 600 mg fluorouracylu (Efudex, Valeant Pharm) na metr kwadratowy dożylnie w dniach i 8. Schemat CEF składał się z sześciu cykli doustnego cyklofosfamidu w dawce 75 mg na metr kwadratowy w dniach od do 14, 60 mg epirubicyny (Pharmorubicin, Pfizer) na metr kwadratowy dożylnie w dniach i 8 oraz 500 mg fluorouracylu na metr kwadratowy dożylnie w dniach i 8. Podczas leczenia CEF, kobiety otrzymywały również profilaktykę antybiotykową z trimetoprimem-sulfametoksazolem (Septra, Glaxo Wellcome) w dawce dwóch tabletek doustnie dwa razy na dobę lub, w przypadku osób, które nie tolerowały trimetoprimu-sulfametoksazolu, norfloksacyny (Norflox, Merck) w dawce 400 mg doustnie. dwa razy dail y lub cyprofloksacyna (Cipro, Bayer) w dawce 500 mg doustnie dwa razy na dobę. Nie należy stosować terapii hormonalnej po zakończeniu chemioterapii.
Wyniki
Najważniejsze wyniki w badaniu MA5 to czas przeżycia bez nawrotów i całkowity czas przeżycia. Zostały one zdefiniowane wcześniej.5,6
Kolekcja próbek
W ramach dokumentacji uzupełniającej do badania MA.5, NCIC CTG zebrał raporty diagnostyczne dotyczące patologii dla każdej kobiety. Do bieżącej analizy patolodzy zostali poproszeni o przedłożenie reprezentatywnej utrwalonej w formalinie, zatopionej w parafinie tkanki guza z każdej kobiety lub, jeśli bloki guza były niedostępne, 20 nieprzezroczystych fragmentów o średnicy 4 .m, do centralnego biura NCIC CTG. Bloki parafiny przechowywano w temperaturze pokojowej, a nie wybarwione odcinki utrzymywano w temperaturze 4 ° C. Próbki zostały zidentyfikowane tylko przez numer identyfikacyjny przydzielony każdemu pacjentowi podczas randomizacji. Barwioną część każdej próbki guza przygotowano z bloków lub szkiełek w celu potwierdzenia diagnozy i zidentyfikowania reprezentatywnych obszarów guza do mikrodysekcji i ekstrakcji DNA do analizy przez reakcję łańcuchową polimerazy (PCR). Sąsiednią sekcję 10-.m uzyskano również dla analizy PCR. Dalsze 4-.m przekroje otrzymano dla analizy immunohistochemicznej i fluorescencyjnej hybrydyzacji in situ (FISH). Wyniki testu zostały zgłoszone do centrali NCIC CTG, gdzie przeprowadzono analizę statystyczną.
Pomiar ekspresji HER2
Ekspresję białka HER2 zmierzono za pomocą analizy immunohistochemicznej z przeciwciałem CB11 (Novocastra) i przeciwciałem TAB 250 (Zymed), jak opisano wcześniej30. W wynikach uwzględniono tylko całkowite wybarwienie błony inwazyjnych komórek nowotworowych. Odsetek komórek z całkowitym wybarwianiem błon oceniano za pomocą półredytatywnego systemu oceny Allred.31. Wynik pięciu lub więcej punktów w analizie immunohistochemicznej uznano za pozytywny dla nadekspresji białka HER2 na podstawie wcześniejszej technicznej walidacji ten punkt odcięcia.30
RYBA
Reprezentatywne wycinki guza hybrydyzowano z użyciem zestawu sondy DNA HER-2 (PathVysion, Vysis), jak opisano wcześniej. 32 Stosunek intensywności barwienia HER2 do chromosomu 17 (oszacowany za pomocą sondy wyliczeniowej centromeru cep 17 ) 2 lub więcej uważano za wskazujące wzmocnienie, zgodnie z zaleceniami producenta.
PCR
Analizę PCR dla amplifikacji HER2 przeprowadzono w sposób opisany przez O Malley a i wsp. 30. Uważano, że względny wzrost liczby kopii genu dwóch lub większej liczby wskazuje na amplifikację.
Analiza statystyczna
Szacunki Kaplana-Meiera dotyczące przeżycia w zależności od obecności lub braku amplifikacji HER2 lub nadekspresji HER2 lub według reżimu leczenia porównano z zastosowaniem testu log-rank
[hasła pokrewne: drzwi wewnętrzne DRE, bruksizm, kabiny toaletowe ]
[hasła pokrewne: spółdzielnia lekarska wrzeszcz, maść cebulowa, sanus stalowa wola ]